Il Metodo
Come è noto agli esperti del settore, il 50% delle specie di uccelli di tutto il mondo sono MONOMORFICI
(cioè le FEMMINE adulte risultano fenotipicamente UGUALI AI MASCHI)
Esistono due geni altamente conservati (CHD: chromo-helicase-DNA-binding) che si trovano sui cromosomi sessuali aviari di tutte le specie di uccelli (eccetto i ratiti, cioè gli struzzi) che possono avere due forme possibili: Z e W: le FEMMINE hanno genotipo ZW mentre i MASCHI hanno genotipo ZZ. E’ stato studiato un test genetico basato sull’analisi molecolare dei due geni CHD che permette di DISTINGUERE I MASCHI DALLE FEMMINE.
Qui di seguito sono riportate le fasi del procedimento di analisi che vanno dall’estrazione del DNA all’analisi in PCR (Polymerase Chain Reaction):
1. Estrazione del DNA dal calamo di penne e purificazione dello stesso.
2. Dosaggio del DNA prima e dopo la sua purificazione.
3. Messa a punto della successiva reazione “specie-specifica di amplificazione” del DNA.
4. Amplificazione con strumentazione dedicata (termociclatore) del DNA estratto (REAZIONE di PCR).
5. Corsa su gel d’agarosio per verificare quali sono i prodotti della reazione di PCR.
6. Confronto dei prodotti ottenuti con campioni positivi noti (maschi e femmine) di quella specie.
7. Analisi dei risultati e determinazione finale del sesso dell’animale testato.
Nella figura sottostante è riportata la fase finale di un’analisi di sessaggio come esempio visivo dei risultati:
